人
<2EU/mL
棕色液体
2~8℃
6个月
实验步骤
1.1 将人的PBMC细胞重悬于含1% HSA的PBS缓冲液中，取样计数，取1×10⁷个细胞至1.5mL Ep管中，1500rpm，离心5min。
1.2 弃上清，取80μL MACS Running buffer（130-091-221）溶液重悬，加入20μL NanoSepTM CD14分选磁珠，混匀后将其放入2~8℃冰箱孵育15min。
1.3 取LS分选柱（130-042-401）放入MACS分选器（130-042-303）上，用1mL MACS Running buffer润洗两次。
1.4 将孵育完成后的样品从2~8℃冰箱取出，加入1mL MACS Running buffer，1500rpm，5min离心，弃上清。
1.5 加入1mL MACS Running buffer重悬，将样品加入分选柱中，待其自然流出后，分两次加入 MACS Running buffer，每次加1mL，15mL管收集流出液。
1.6 待MACS Running buffer全部流出后，将分选柱从MACS分选器上取下，放到另一新的15mL离心管中，向分选柱中加入3mL MACS Running buffer，用LS分选柱配套活塞将液体直接打出。
1.7 将装有收集液的15mL离心管放入水平离心机，1500rpm，离心5min。
1.8 离心完成后倒掉上清，取1mL 1×DPBS溶液重悬细胞，计数并进行流式检测。
磁珠与细胞孵育时需要彻底混匀，以提高分选效率。
NanoSep™CD14分选磁珠可用于富集分选或者去除分选人PBMC中的单核细胞和巨噬细胞，通过在磁珠上偶联抗CD14单克隆抗体，实现CD14⁺细胞的分选。利用NanoSep™CD14分选磁珠与PBMC孵育并进行磁性分离，使CD14⁺细胞分离并富集，起到纯化CD14⁺细胞的作用和功能。
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